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PCR快速檢測奇異變形桿菌的研究

更新時(shí)間：2013-08-14 點(diǎn)擊次數(shù)：2010次

目的建立一種檢測奇異變形桿菌（Proteus mirabilis）快速且特異的PCR方法。方法針對編碼奇異變形桿菌脲酶調(diào)節(jié)子（ureR）的基因序列設(shè)計(jì)2條PCR引物,擴(kuò)增片段長度為225bp;通過對2株奇異變形桿菌和14株非奇異變形桿菌進(jìn)行PCR檢測、利用該P(yáng)CR方法和傳統(tǒng)分離培養(yǎng)法同時(shí)對60份食物中毒送檢標(biāo)本進(jìn)行檢測來評價(jià)其特異性;將奇異變形桿菌菌液做一系列10倍稀釋后進(jìn)行PCR檢測來對其進(jìn)行敏感性分析。結(jié)果2株奇異變形桿菌出現(xiàn)PCR擴(kuò)增反應(yīng),擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)測序鑒定正確,14株非奇異變形桿菌沒有出現(xiàn)PCR擴(kuò)增反應(yīng),且PCR檢測奇異變形桿菌的結(jié)果與傳統(tǒng)培養(yǎng)方法一致,PCR方法相比傳統(tǒng)培養(yǎng)方法更快速,在4h內(nèi)即可完成擴(kuò)增反應(yīng);PCR方法敏感性為30cfu/ml。結(jié)論建立了一種快速、準(zhǔn)確檢測奇異變形桿菌的PCR方法,適合奇異變形桿菌日常監(jiān)測和快速診斷的需要。

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